摘要：

调节性T细胞(Tregs)是一种有前景的候选细胞疗法，用于治疗自身免疫性疾病，并有助于移植实体器官的寿命。尽管使用人Treg治疗的临床试验数量不断增加，但有关其体内的作用机制、分布和功能等重要问题仍然没有得到解答。研究发现，病灶组织中Treg的积累对Treg治疗效果至关重要，但现有的血液生物标志物不太可能准确反映其在组织中的分布状态，然而想要解决上述问题，分子影像方法无疑是最具前景的研究手段，通过长半衰期的放射性核素⁸⁹Zr直接标记Treg，采用正电子发射断层扫描（PET）就可以实现对其进行一周以上的体内追踪，用于评估⁸⁹Zr多克隆Treg的体内的分布与摄取。研究团队使用[⁸⁹Zr]Zr(oxinate)4作为细胞标记物，成功实现了人体Treg细胞在0.1-11.1 Bq ⁸⁹Zr/Treg细胞的放射标记效率，这一剂量将满足超过一周的PET体内细胞跟踪。研究团队还对⁸⁹Zr Tregs进行了表征，评估了它们的表型，发现这些放射性标记的Treg细胞对⁸⁹Zr表现出不耐受，因此⁸⁹Zr多克隆Treg不能以⁸⁹Zr的半衰期来评估标记物在体内的存活时长和扩散状况。此外，研究团队还通过PET成像发现在体内过继移植8放射性标记物后，⁸⁹Zr-Treg出现死亡迹象，因此，由于⁸⁹Zr Tregs的存活率和扩散问题，数周内体内对⁸⁹Zr/Treg细胞的跟踪并未达到预期结果。最终我们得出结论，间接Treg标记可能是更符合中长期细胞追踪的方案。

移植器官内Treg的比例和移植物存活率存在一定的相关性，研究团队主导的临床试验数据表明Treg疗法的安全，耐受性良好且有疗效，并且通过全身PET成像进行细胞追踪可以观察和解决Treg在体内分布和代谢等重要问题。利用⁸⁹Zr对多克隆Treg的放射性标记，通过PET/CT可对其进行一周以上的体内追踪。 

小鼠麻醉后进行⁸⁹Zr Tregs和HLA-A2阴性CD25-PBMC共同给药到尾静脉，给药45分钟后进行CT图像采集，60分钟后进行PET图像采集。后续分别于给药48小时，120小时进行成像。

体内PET/CT成像结果表明，⁸⁹Zr-Tregs最初符合静脉注射细胞的预期表现，即它们在给药1小时后积聚在肺部，在之后的一天内它们中的大部分在肺部清除，并在体内其他地方重新分布，有趣的是，Treg在骨骼中的积聚出乎意料之外。此外，随着时间的推移，它们在全身的骨骼中显著增加，据推测，这应该些来自骨骼的⁸⁹Zr信号应该与游离的⁸⁹Zr快速矿化有关，这表明⁸⁹Zr从⁸⁹Zr- treg流出(从而失去跟踪treg的能力)或⁸⁹Zr- treg在给药5天后伴随游 treg的死亡而出现游离的⁸⁹Zr。

团队：纪念斯隆-凯特琳癌症中心是世界上历史悠久、规模弘大的私立癌症中心。130余年来，该中心一直致力于卓越的患者护理，创新的研究和一流的医学教育项目，现已成为美国国家癌症研究所（National Cancer Institute）指定的45所综合癌症中心之一，迎来了先进科学、临床研究和治疗的蓬勃发展。